Širenje karantenskih patogena predstavlja značajan rizik za globalnu proizvodnju usjeva, ugrožavajući zdravlje usjeva i narušavajući agroekosisteme. Pravovremeno i precizno-otkrivanje na lokaciji je ključno za sprječavanje izbijanja. Rekombinazna polimeraza amplifikacija (RPA) i višekomponentni DNAzyme (MNAzyme) su obećavajuće tehnologije izotermne detekcije; međutim, njihova integracija je ometena zahtjevom jednolančane DNK (ssDNA) za aktivaciju MNAzyma, pošto RPA generiše dvolančanu DNK (dsDNA). Da bismo ovo riješili, razvili smo OAR-MNA biosenzor, inovativnu jedno{7}}platformu koja povezuje asimetrični RPA (aRPA) sa MNAzyme-potpomognutim recikliranjem meta. Biosenzor je primijenjen za detekciju Acidovorax citrulli, uzročnika bakterijske mrlje na plodovima (BFB) u tikvicama. Podešavanjem koncentracije RPA prajmera, aRPA generiše obilje ssDNK, omogućavajući vizuelnu detekciju A. citrulli sa granicom detekcije od 20 kopija/μL i savršenom specifičnošću, nadmašujući performanse fluorescentnog RPA. Biosenzor je pokazao 100% podudarnost sa qPCR u uzorcima sjemena i održao robustan učinak u homogenatu dinje s šiljcima. Naša komparativna analiza otkrila je prednosti OAR-MNA sistema, uključujući smanjene troškove detekcije i poboljšanu primjenu na terenu. Kada je povezan sa prenosivim DNK analizatorom, biosenzor pruža-prilagođene rezultate (+/−), što ga čini idealnim za-primenu na lokaciji. Beyond BFB
detekcija, OAR-MNA je uspješno primijenjena na otkrivanje virusa mozaika zelene mrlje krastavca (CGMMV), RNA karantinskog patogena koji uzrokuje ozbiljne gubitke u proizvodnji usjeva tikvice. Omogućavanjem rane, precizne-dijagnoze na licu mjesta, OAR-MNA biosenzor predstavlja napredak u tehnologiji detekcije biljnih patogena, nudeći obećavajući alat za očuvanje globalne proizvodnje usjeva.
