Stafilokok hemolitikus je gram-pozitivnu koagulaznu negativnu bakteriju koja je vrlo česta u bolnicama. Posljednjih godina su infekcije stečene bolnice dobile sve veću pažnju zbog većeg rizika. Stafilokok hemolitikus može dalje uzrokovati infekcije kože, meningitis, peritonitis, pa čak i sepse. Kašnjenja u kliničkoj dijagnozi mogu dovesti do pogoršanja zdravstvenog stanja, tako da je brza dijagnoza S. hemolitikusa ključna za precizno liječenje.
Istraživački tim učitelja Ji Tuo iz centralnog laboratorijskog odeljenja Lianyungang, Kina je objavio članak "Brzo i vizuelno otkrivanje stafilokoka hemolitika u kliničkim uzorcima sa Mira-LFS-om" u časopisu "Analytica Chimica Acta", sa faktorom uticaja 6.2.
1. Pregled pregleda
U ovoj studiji uspostavljen je Mira-LFS metoda zasnovana na genu MVAA-e za otkrivanje stafilokoka hemolitika. Multi-enzimska izotermalna tehnologija pojačanja nukleine kiseline Mira kombinirana je sa lačnim testnim LFS-om za protok kako bi se postigla brzo otkrivanje patogena.
Eksperiment je proveden u 37 stepeni, a rezultati se mogu otkriti u roku od 9 minuta. Osjetljivost otkrivanja bila je 0. 147CFU / reakcija.
Metoda otkrivanja Mira-LFS-a pogodna je za otkrivanje fiksne tačke hemoltikusa stafilokoka u kliničkim uzorcima, realizacija PoCT metode za identifikaciju stafilokoka hemoltikusa, što je od velike vrijednosti za brzu dijagnozu i liječenje u područjima sa nedovoljnim medicinskim uslugama.
Istraživački tim koristio je Mira-LFS, QPCR i tradicionalne metode bakterijske kulture za analizu 95 slučajnih kliničkih uzoraka i potvrdilo kliničku primjenu.
2. REGRAVLJINE METODE
Shematski dijagram otkrivanja Mira-LFS prikazan je gore.
Istraživanje Rabljeni BIOTECH DNK Isetermalni brzi pojačani komplet (koloidni zlatni testni trak) i trake za otkrivanje nukleinskih kiselina.
Duljina temeljnog temeljnog temeljana MVAA je 30-35 nukleotidi, a dužina pojačanja je 100-350 bp. Dizajnirano je ukupno 6 pari kandidatskih prajdova. Mira analiza izvršena je pomoću GDNA-e Standard Staphylococcus HEMOLYTICUS sojeva, ekranirani su kandidatski temeljini temeljini, a pojačani proizvodi su prikazani pomoću 2% agarozne gel elektroforeze.
Zatim dizajnirajte sondu na osnovu redoslijeda prema naprijed (produžavate 16 bp unazad). Kraj sonde 5 'bio je označen fitcom, a 3' kraj je označen s blokiranjem C3. Koristite THF da biste zamijenili 31 nukleotid u sondi. THF je 30 bp od kraja 5 'i 15 bp od kraja 3'. 5 'Kraj odabranog reverznog temeljnog premaza označen je biotinom.
Štaviše, istraživački tim optimizirao je reakcijsku uslove za otkrivanje mira-LFS-a za stafilokok hemolitikus. Test u 37 stepeni u intervalima od 2 minute od 4 do 12 minuta. Rezultati se prikazuju u vrijeme reakcije 8 min, a testna linija je jasno vidljiva. Pored toga, testovi se provode u intervalima od 5 stepeni od 22-52 stepena. 37-42 Stupanj je najprikladnija temperatura za otkrivanje Mira-LFS-a. Stoga je optimalno vrijeme reakcije i temperatura MIRA-LFS metode za stafilokok hemolitikus 8 min, odnosno 37 stepeni. Zajedno s konačnim rezultatom LFS vizualizira u roku od 1 minute, ukupno vrijeme otkrivanja je 9 minuta.
3.Experimentalni rezultati
Provjera osjetljivosti
Astay Mira-LFS izveden je na različitim koncentracijama genomske DNK (GDNA) dobivene od serijski razblaženih stafilokoka hemolitikusa (1 {3}} ^ 6-10 ^ 0 CFU / ml).
Probabilistička jedinica Regresijska analiza pokazala je da je 95% koje je utvrdila Mira-LFS test bila 0. 147 CFU / reakcija.
Provjera specifičnosti
Analizom 18 uobičajenih patogenih mikrobnih sojeva i 15 kliničkih stafilokoka hemolitikusa, bilektivnost otkrivanja mira-LFS-a za detekciju stafilokoka hemolitikusa. Rezultati su pokazali da je Mira-LFS test bio negativan za još 18 patogenih bakterija i pozitivno za 15 provjerenih kliničkih uzoraka stafilokoka hemolitika.
Mira-LFS Detection je vrlo selektivan i pogodan za skriniranje stafilokoka hemoltikusa.
Stvarni testiranje uzorka
Lianyungang Drugo narodna bolnica nasumično je sakupila 95 uzoraka, uključujući 35 uzoraka kože i mekih tkiva, 16 uzoraka urina, 14 uzoraka ispljunih i 30 uzoraka krvi.
Rezultati su pokazali da je metoda otkrivanja bila 100% u skladu sa QPCR metodom. Pored toga, u usporedbi sa zlatnim standardom (GB / T4789. 11-2003), osetljivost i specifičnost metode otkrivanja Mira-LFS za identifikaciju infekcije stafilokokunom hemolitikusom bile su 100%, odnosno 98,73%. Ovi su rezultati dodatno provjerili tehničku izvodljivost ove metode u otkrivanju stafilokokunog hemolitikusa u kliničkim uzorcima.
Metoda MIRA-LFS koristi se za brzo otkrivanje PoCT-a od stafilokoka hemoltikusa. To je efikasno, precizno, jednostavno i jeftino i pomaže u donošenju brze dijagnoze i donošenja liječenja.
Saznajte o Mira tehnologiji
Multi-enzimsko i izotermna tehnologija pojačane i izotermne brzine nukleinske kiseline pojačava nukleinske kiseline na konstantnoj temperaturi od 39 stepeni -42 stepen, sa reakcijom samo 5-20 minuta. Pored toga, strogi laboratorijski uvjeti nisu potrebni, a scenariji prijave su raznovrstan: općim pansionima bolnice, primarna njega, testiranje kućnog testiranja, polja itd.
Obrasci proizvoda reagensa su raznoliki: zamrznuti prah, mikrosfere osušene smrzavanjem itd.; Rezultati prikaza su raznoliki: gel elektroforeza, krivulja fluorescencije, koloidne testirane trake zlata itd. Reagens ima stabilne performanse, i povoljno je za skladištenje i transport.
Uz Miru kao osnovnu platformu, razvio je niz pratećih proizvoda poput "ultra-brza tehnologije za oslobađanje kiseline", "Integrirani potpuno automatski sistem za otkrivanje zatvorenog", "Uređaj za otkrivanje nukleine kiseline", itd. Itd. Kreirajte cjelokupno rješenje za brzo otkrivanje molekularne detekcije.